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  • 2021

    7-12

    色譜柱在使用前,最好進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。樣品的前處理過程:(1)最好使用流動相溶解樣品。(2)使用預(yù)處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。(3)使用0.45μm或0.22μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。實際使用中,液相色譜柱有可能會失效,常見的原因有:1、色譜柱...

  • 2021

    7-6

    使用高效液相色譜柱做HPLC分析時,通常會遇到色譜柱柱壓過高等情況,色譜柱柱壓過高原因何在?怎么解決呢?高效液相色譜柱柱壓高原因與解決方法:色譜柱柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因:1、拆去保護(hù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問題,若柱壓仍高,再檢查2、把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查3、將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱...

  • 2021

    7-5

    液相色譜柱流動相的配制和流速的選擇1、流動相的配制液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:(1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。(2)流動相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。(4)流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制...

  • 2021

    6-28

    氣相色譜柱在石油、化工、生物化學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)、環(huán)保等方面應(yīng)用很廣。它除用于定量和定性分析外,還能測定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量和比表面積等物理化學(xué)常數(shù)。氣相色譜柱柱溫的選擇:柱溫是影響分析時間和分離度的重要因素。選擇柱溫的依據(jù)是樣品的沸點范圍,固定液的配比,允許使用溫度,以及檢測器的靈敏度。柱溫主要影響分配系數(shù)、容量因子以及組分在流動相和固定相中的擴(kuò)散系數(shù),從而影響分離度和分析時間。選擇溫柱的原則,一般是在使難分離物質(zhì)對達(dá)到要求的分離度條件下,盡可能采...

  • 2021

    6-23

    液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分,其規(guī)格有哪些呢?按用途可分為分析型和制備型兩類①常規(guī)分析柱(常量柱),內(nèi)徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內(nèi)徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細(xì)管柱(又稱微柱microcolumn),內(nèi)徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內(nèi)徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內(nèi)徑20~40mm,柱長10~30cm;⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。液相色譜柱的一些注意事項:1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動溫度的突然變化...

  • 2021

    6-18

    UHPLC色譜柱特點:●高純球形硅膠填料?!窳接?.8μm和2.2μm鍵合各種官能團(tuán)?!駲C(jī)械穩(wěn)定性優(yōu)異,可耐受壓力至10000psi。●中性、酸性、堿性化合物峰形美,柱效高?!裰噩F(xiàn)性好。UHPLC色譜柱的維護(hù)措施:1、使用保護(hù)柱2、大多數(shù)柱的PH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡可能在此范圍內(nèi)使用3、避免流動相組成及極性有劇烈變化4、流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理5、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,要在實驗完畢將柱子沖洗干凈6、壓力升高時更換保護(hù)柱

  • 2021

    6-15

    免疫親和柱的全稱為免疫親和層析柱(immnuoaffinitychromatographycolumns,IAC),常簡稱為:親和柱、免疫親和柱、親和層析柱等。它是利用抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原抗體的高選擇性,從復(fù)雜的待測樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將抗體與惰性微珠共價結(jié)合,然后裝柱,將抗原溶液過免疫親和柱,而非目標(biāo)化合物則沿柱流下,最后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。使用免疫親和柱凈化的優(yōu)勢:因為免疫親和柱的高特異性,使用免疫親和柱凈化可...

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